猪妈妈关爱行动——“泻芷优”抑制母猪排毒的腹泻疫苗
发布时间:
2018-10-09 00:00
作者:
技术服务部
泻芷优——抑制母猪排毒的腹泻疫苗
-
先进培养技术,抗原效价高,免疫原性更好。
-
分级微滤与超滤的纯化技术,抗原纯度高,安全性好。
-
优选优化腹泻疫苗株的应用,保护范围更广。
-
进口铝胶佐剂,颗粒细小而均匀,抗原吸附更好。
-
泻芷优母猪产前两次免疫,产生保护性中和抗体,抑制母猪排毒。
-
泻芷优母猪产前两次免疫,免疫后母猪乳汁中含有高水平的SIgA,哺乳仔猪在摄取母猪初乳时获得SIgA而获得对PEDV的抵抗力。
猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的以仔猪呕吐、腹泻、脱水、死亡为主要特征的一种急性、高度接触性、病毒性肠道传染病。我国于1983 年首次发现该病,随后开始在我国呈散发性、区域性流行。但自2010 年末开始,我国猪场陆续暴发了由PEDV引起的以新生仔猪严重呕吐、水样腹泻、肠道出血和高病死率为主要特征的“顽固性腹泻”疫情,引起了业界的广泛关注。现在普遍认为PED是未来危害仔猪健康最为严重的疾病之一。
猪传染性胃肠炎(TGE)是由猪传染性胃肠炎病毒引起猪的一种高度接触性消化道传染病。以呕吐、水样腹泻和脱水为特征。OIE将其列为B类动物疫病。
一
PED流行病学监测情况
随着PED日益流行,以及我国对PEDV 感染的逐步重视,我国研究学者对不同地区的PEDV 感染情况进行了大量的流行病学监测。自2010 年以来,我国猪场PEDV 阳性感染率一直居高不下,区域性流行特点显著,如2012—2013 年四川的感染率高达86.67%,2014—2015 年山西的感染率达73.26%,2016—2017 年黑龙江、吉林、辽宁、河北等4省的感染率达74.62%。PEDV在我国猪群中已广泛流行,且在个别地区感染率较高,感染情况比较严峻,应加强重视。
二
PED近几年发病特征
1、易感猪的日龄范围扩大:2日龄-20周猪均发病(包括哺乳母猪),7日龄内仔猪的死亡率可高达100%。
2、临床表现:呕吐,水样腹泻,其他症状不明显。
3、复发:间隔二十天后再次发生,有的猪场反复4次以上。
4、持续时间长:可长达数月,最长可达半年。
5、温度很高的季节依然发生,7~8 月份依然有疫情发生。
6、母猪也会有轻微的腹泻症状和食欲减退。
7、对母猪生产性能造成很大影响(不发情或返情率增加),经产母猪非正常淘汰率增加。
8、给养猪业造成巨大的经济损失。
三
分析与讨论
目前,我国猪群感染猪流行性腹泻相当普遍,截至2018年1月中旬,我国腹泻疫情屡屡发生,猪流行性腹泻给我国养猪业造成巨大的经济损失。面对近年来的腹泻疫情,在临床生产实践中一些经典的腹泻疫苗不能很好地抵抗疾病,因此,饲养者们通过选择合适的疫苗进行科学的免疫防疫才是科学有效的防控手段。
当怀孕母猪产生免疫并通过母源抗体,保护其后代,可停止发生(10版猪病学)。
多年来,中岸生物对PED疫苗的研发工作一直没有停滞。筛选和培育出具有良好免疫原性、高抗原效价的毒株是疫苗研制成功的关键。动物机体抗感染免疫的过程中,体液免疫和细胞免疫都非常重要。目前,基于腹泻疫情发生形势的变化,结合现有腹泻疫苗研究概况,我们认为今后对猪流行性腹泻疫苗的研发可以从以下方面加以重视:
1、猪流行性腹泻近几年有新变化,研究人员可以长期监测腹泻疫情的发生,加快科技转化为生产力的进度,加快实验室研发转化为生产的速度,使养猪业受惠。
2、有针对性地考虑加强联苗的研发。持续追踪调查,检测和分离临床上与PEDV 共感染的其他肠病毒,作为多联疫苗毒株的候选。
四
防控PED为什么用灭活疫苗
通过疫苗防控病毒性腹泻,已经是公认的最好的防御措施,但活疫苗和灭活疫苗的免疫效果如何,疫苗如何组合免疫效果更好,韩国研究人员做了相关的实验。本研究使用的活疫苗和灭活疫苗均来自韩国,20头配种母猪随机分成4组,每组5头。4组分别为非免疫阴性组、灭活苗免疫组和灭活疫苗加强组(K/K)、活疫苗免疫组和活疫苗加强组(L/L)、活疫苗免疫组和灭活疫苗加强组(L/K)。根据标准疫苗免疫指导方针进行免疫PEDV疫苗。母猪免疫两次,分娩前4周和前2周各免疫一次。疫苗进行肌肉注射免疫。血清和初乳的ELISA检测、血清中和试验根据标准方法进行。结果表明,母猪血清样品中,K/K组有较高的IgG抗体滴度,比L/L组或L/K组高2倍, 母猪血清中的IgG可以保护母猪不受PEDV感染;初乳样品中,K/K组的SIgA水平最高,母乳中的SIgA抗体滴度高,为哺乳仔猪对抗PEDV提供了保护力;三组仔猪血清的SIgA滴度,K/K组的SIgA水平最高(下图)。
血清中和滴度。L/L、L/K或K/K免疫的母猪血清、初乳和仔猪血清进行中和试验评估抗体的潜在保护力。
血清中和抗体是疫苗效力最重要的因素。K/K免疫组母猪和仔猪具最有效的中和抗体,尤其体现在初乳中。这个发现非常重要,因为关乎到PEDV疫苗接种策略,PEDV主要依靠被动免疫获得有效的保护性抗体,哺乳仔猪在摄取母猪初乳时获得SIgA而获得对PEDV的抵抗力。母猪血清中的IgG可以保护母猪不受PEDV感染,另外,据报道,美国的一项研究表明,给产前母猪免疫灭活疫苗可以激起母猪对PEDV的免疫回忆应答,激发母猪肠道粘膜分泌SIgA(随后激发肠道乳腺链接,从而诱导催乳免疫,乳腺分泌SIgA),肠道粘膜SIgA可聚集潜在和入侵的PEDV,使之易于通过蠕动纤毛运动和粘液将其清除,以保护肠道屏障的完整,让母猪减少PEDV排毒或不排毒,从而减少对仔猪PEDV的垂直传播。
尽管,PED疫苗的效力普遍还存在争议,目前的研究表明,给产前母猪免疫和加强免疫灭活疫苗能够刺激母猪产生较高水平的IgG和SIgA抗体滴度。K/K组能为母猪和仔猪提供最有效的中和抗体。“泻芷优”比目前市场竞品的抗原含量高10-100倍,母猪产前免疫“泻芷优+泻芷优”程序是猪场预防PED的最好选择。
五
为什么采用后海穴注射
猪后海穴位于畜禽尾根与肛门间凹陷处。大量试验结果表明后海穴注射同时发挥了经络腧穴的传导治疗作用和传统给药途径的药理治疗作用,使疫苗作用的速度和强度超过同等剂量下的肌肉注射。 而且已经有不少试验结果表明后海穴对疫苗的放大作用与免疫功能密切相关。通过猪后海穴注射与常规口服、肌肉注射3种途径免疫猪传染性胃肠炎和流行性腹泻二联疫苗,结果表明母猪初乳、常乳及免疫仔猪血清中IL-2的含量以穴位免疫最高。IL-2是一种白介素,是免疫系统中的一类细胞生长因子,能调控免疫系统中白血球的细胞活性,也参与抗体反应。
1、IL-2可刺激T细胞产生多种淋巴因子。
2、IL-2直接作用于B细胞,促进其增殖、分化和IgG分泌。
3、IL-2可活化巨噬细胞。
4、IL-2对某些因细胞免疫功能低下而受病毒感染,需增强细胞免疫功能的动物有一定疗效。
5、IL-2可通过增强CTL(一种特异T细胞)活性,分泌各种细胞因子参与免疫作用,对病毒、肿瘤细胞等抗原物质具有杀伤作用,与自然杀伤细胞构成机体抗病毒免疫的重要防线。
6、IL-2可同时增强NK(自然杀伤细胞,是机体重要的免疫细胞,与抗病毒感染和免疫调节有关)活性以及诱导干扰素产生而介导抗病毒感染的。
7、IL-2可提高机体保护性免疫应答的水平。
六
泻芷优产品优势及技术特点
图一:被动免疫与竞品的比较(PED);图二:主动免疫与竞品的比较(PED)
图三:被动免疫与竞品的比较(TGE);图四:主动免疫与竞品的比较(TGE)
七
产品质量
通过分级微滤与分级超滤的纯化工艺,大大减少了半成品毒液中的大分子与小分子杂蛋白的干扰,疫苗安全性更好,免疫效果更佳。
用实时荧光定量PCR进行病毒拷贝数的测定,与竞品比差异显著,一般疫苗是28-10,泻芷优可以达到212。
泻芷优常规免疫二免后14天腹泻中和抗体不低于1:32,28天腹泻中和抗体不低于1:64,胃肠炎中和抗体不低于1:32。
腹泻二联苗的效力检验-qPCR
相同抗原效价的条件下,泻芷优所含的病毒拷贝数更多,有效抗原含量更高。泻芷优腹泻病毒拷贝数为1010/ml,比市场竞品(市场竞品病毒拷贝数为108-109/ml)高10-100倍。
与疫苗安全性相关的重要指标
八
产品的研发与核心技术
分级微滤与超滤纯化技术
1、先进培养技术,抗原效价高,免疫原性更好。
2、分级微滤与超滤的纯化技术,抗原纯度高,副反应更小。
3、优选优化腹泻疫苗株的应用,保护范围更广。
4、进口铝胶佐剂,颗粒细小而均匀,抗原吸附更好。
进口纳米铝胶佐剂的优势
新型进口纳米铝胶佐剂,颗粒细小而均匀,抗原吸附率明显高于国产铝胶佐剂。
九
建议免疫程序
用优选优化的PEDV疫苗株制备的灭活疫苗(泻芷优)有比较理想的保护力,推荐免疫程序:
1、后备母猪:
配种前后海穴注射免疫三次泻芷优,每次2毫升/头猪;
2、经产母猪:
产前6周、4周各后海穴注射一次泻芷优,每次2毫升/头猪。